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美国ABI 9700 普通PCR仪维护保养中,需要注意的问题

点击次数:18 发布时间:2019-01-02
   虽然美国ABI 9700 普通PCR仪不是一种计量仪器,但其主要作用原理与基本计量要素密切相关,要求较高,一旦失控,仪器将不能正常工作,所以PCR仪器也需要定期检测和维护,这对依赖自然风降温的PCR仪器尤为重要。
 
  美国ABI 9700 普通PCR仪可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为美国ABI 9700 普通PCR仪。因为被扩增的不同的DNApian段其zui适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的zui适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。
 
  实时荧光定量PCR仪:在美国ABI 9700 普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。
 
  普通的PCR仪:把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。
 
  梯度PCR仪:把一次性pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件,通常12种温度梯度,这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其zui适退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,就可以筛选出表达量高的zui适退火温度,进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。主要用于科研,教学机构。美国ABI 9700 普通PCR仪,在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。
 
  在美国ABI 9700 普通PCR仪的维护保养中,需要注意以下问题:
 
  1)PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半年至少一次。
 
  2)PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1~2℃时,可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。
 
  3)PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制,要求越短越好,当PCR仪的降温过程超过60s,就应该检查仪器的制冷系统,对风冷制冷的PCR仪要较彻底地清理反应底座的灰尘;对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。
 
  4)一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时,不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件,必要时要请专业人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。
 
  美国ABI 9700 普通PCR仪下面介绍一些具体的保养维护方法:
 
  1.样品池的清洗
 
  先打开盖子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液体,用棉签吸干剩余液体;打开PCR仪,设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行,让残余液体挥发去除。一般5~10min即可。
 
  2.热盖的清洗
 
  对于荧光定量PCR仪,当有荧光污染出现,而且这一污染并非来自样品池时,或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时,需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面,确保样品池的孔干净,无污物阻挡光路。
 
  3.仪器外表面的清洗
 
  清洗仪器的外表面可以除去灰尘和油脂,但达不到消毒的效果。选择没有腐蚀性的清洗剂对PCR仪的外表面进行清洗。
 
  4.更换保险丝
 
  先将PCR仪关机,拔去插头,打开电源插口旁边的保险盒,换上备用的保险丝,观察是否恢复正常。
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